乳酸脱氢酶 乳酸脱氢酶测定方法

方法：

实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。

1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。

为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl（取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃，60分钟。

3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。

4. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同生物素标记抗体工作液） 100μl，37℃，60分钟。

5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。

7. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。 在加终止液后15分钟以内进行检测。

以上内容为我们介绍了乳酸脱氢酶测定方法，我相信这些内容可以引起大家的兴趣，我相信大家可以有效的最快的直接的测定出乳酸脱氢酶，可能你也是一个研究爱好者，那就赶快去实践一翻吧！

一概念

乳酸脱氢酶是一种糖酵解酶。乳酸脱氢酶存在于机体所有组织细胞的胞质内，其中以肾脏含量较高。乳酸脱氢酶是能催化丙酮酸生成乳酸的酶，几乎存在于所有组织中。同工酶有六种种形式，即LDH－1（H4）、LDH-2（H3M）、LDH－3（H2M2）、LDH-4（HM3）、LDH-5（M4）及LDH-C4，可用电泳方法将其分离。LDH同功酶的分布有明显的组织特异性，所以可以根据其组织特异性来协用诊断疾病。正常人血清中LDH2，〉LDH1。如有心肌酶释放入血则LDH1〉LDH2，利用此指标可以观察诊断心肌疾病。

二升高的原因

至于乳酸脱氢酶高的原因，有以下方面：

1．当乙肝病毒携带者病情恶化成乙肝患者时，部分肝细胞受损，血清中LDH4和LDH5含量就会有不同程度的增高。

2．乙肝治疗方法特别是是用药不当，长期服用同一种药物时造成肾毒现象的产生。当肾毒现象出现时，血清中乳酸脱氢酶含量会迅速升高。

3．乙肝不进行合适积极的治疗，发展到一定程度时会造成肝脏代谢严重异常，导致肾脏功能衰竭，从而也会引起乳酸脱氢酶含量升高。

4．肺梗塞、恶性贫血、休克及肿瘤转移所致的胸腹水时，会引起乳酸脱氢酶的偏高。

三偏低的原因

乳酸脱氢酶存在于机体所有组织细胞的胞质内，其中以肾脏含量较高。血清乳酸脱氢酶正常范围是100～300U/L，当出现乳酸脱氢酶偏低时，常见原因如下。

乳酸脱氢酶偏低的原因1：检查过程中出现误差;

乳酸脱氢酶偏低的原因2：内分泌失调;

乳酸脱氢酶偏低的原因3：过于劳累、睡眠不好、心情不好等。

总之，乳酸脱氢酶偏低一般不是很严重，经过调理即可恢复。但如果出现乳酸脱氢酶偏高就要引起重视了。因为肺梗塞、恶性贫血、休克及肿瘤转移所致的胸腹水时，会引起乳酸脱氢酶的偏高。

四怎么办

血清中乳酸脱氢酶偏高主要有恶性肿瘤，肝炎、肝硬化等疾病引起的，乳酸脱氢酶检查偏高常见于急性肝炎、阻塞性黄疸、心肌炎、恶性肿瘤、肝硬化、肝癌、运动肌肉营养不良、急性白血病及恶性贫血等病症。临床医学实践表明，80%以上患者体内的血清乳酸脱氢酶升高是由肝脏疾病引起的，尤其是急性乙肝、肝硬化、肝癌等。因此，若患者发现乳酸脱氢酶在血清中的含量不再正常范围之内，应及时到肝病医院进行检测，在医生的指导下进行有针对性的治疗。

相信大家看完上面的内容就对乳酸脱氢酶的相关内容有所了解了吧，上面的内容大家要好好的看看欧，乳酸脱氢酶到底是干什么的，以后遇到它，也会多少了解一点，不会那么恐惧，乳酸脱氢酶是个很重要的指标的，这种病一定要引起大家的重视，否则时间长了出现其它麻烦的症状，到时说什么也就晚了，大家一定要关爱自己的身体健康，好好照顾自己和家人，毕竟健康是第一位的。身体是经不起折腾的。

一、乳酸脱氢酶简介

正常范围：血清100～300U／L；尿560～2050U／L；脑脊液含量为血清的1／10。

检查介绍：乳酸脱氢酶是一种糖酵解酶。乳酸脱氢酶存在于机体所有组织细胞的胞质内，其中以肾脏含量较高。

临床意义：增高：见于肝炎、肝硬化、肝癌、心肌梗死、横纹肌损伤、心肌炎、恶性肿瘤、肾病、肺梗死、巨幼细胞贫血、白血病、恶性淋巴瘤及妊娠等。

二、乳酸脱氢酶偏高的原因

1、肌营养不良：肌营养不良病人血液中LDH4、LDH5显著升高。

2、肝脏疾病：肝脏病变，肝细胞受损的时候，血液中LDH4和LDH5会显著升高。LDH5/LDH4<1常提示是原发性肝癌。急性肝炎LDH5明显升高，LDH4不增。而慢性肝炎则表现为LDH5持续升高或者下降后再升高。

3、肺部疾病：肺部疾患时血清LDH3常可升高。肺脓肿病人的血清LDH3、LDH4常与LDH5同时升高。

4、心脏疾病：病毒性和风湿性心肌炎、克山病心肌损害、急性心肌梗塞时，血清LDH1和LDH2显著升高。

5、肾脏疾病：急性肾小管坏死、慢性肾小球肾炎以及肾移植排异时，血清LDH5均可增高。

6、当乙肝病毒携带者病情恶化成乙肝患者时，部分肝细胞受损，血清中LDH4和LDH5含量就会有不同程度的增高。

7、乙肝治疗方法特别是是用药不当，长期服用同一种药物时造成肾毒现象的产生。当肾毒现象出现时，血清中乳酸脱氢酶含量会迅速升高。