参考的抗体有下面几种
1. Bax, western用,当然能做免疫组化更好,不知道两者兼顾的是不是更贵一点,CST的网站上有这几种,
No. Name Applications Reactivity No.
Name
Applications
Reactivity
5023
Bax (D2E11) Rabbit mAb
W IP IHC-P H
2772
Bax Antibody
W IP H M R Mk
2774
Bax Antibody (Human Specific)
W IP IHC-P H Mk
不知道后面的那个reactivity是什么意思,我做的是人的胃癌细胞株跟白血病细胞株。
2.Bcl-2,跟前面一样的要求。
2870
Bcl-2 (50E3) Rabbit mAb
W IP H M R (Mk) (C) (B) (Dg)
3498
Bcl-2 (D17C4) Rabbit mAb (Mouse Preferred)
W IP H M
4223
Bcl-2 (D55G8) Rabbit mAb (Human Specific)
W IP H
2876
Bcl-2 Antibody
W H M R
2872
Bcl-2 Antibody (Human Specific)
W H
这几种后面的mouse prefered跟human specific是什么意思。
3.actin,western用
4970
β-Actin (13E5) Rabbit mAb
W IHC-P IHC-F
IF-IC F
H M R Mk B Pg (C) (Dg) (Hr)
5057
β-Actin (13E5) Rabbit mAb
(Biotinylated)
W F H M R Mk B Pg (C) (Hr)
5125
β-Actin (13E5) Rabbit mAb
(HRP Conjugate)
W H M R Mk B Pg (C) (Hr)
8457
β-Actin (D6A8) Rabbit mAb
W IF-IC H M R
3700
β-Actin (8H10D10) Mouse mAb
W IHC-P IF-IC
F
H M R Hm Mk
4967
β-Actin Antibody
W
H M R Hm Mk Mi Dm Z B (C) (X) (Dg) (Pg) (Hr)
Actin主要看报价哪个便宜并且稳定一点,如果有推荐的更好。不一定非得CST公司的,其他的内参也可以。
如何储存 CST 的抗体?
答:请将抗体的原始管储存到 -20°C,不要分装。因为抗体储存在含有 50% 甘油的缓冲液中,所以抗体在 -20°C仍为液体状态,不会因为反复冻融而降解。具体储存温度请参考产品说明书。
2. 问:如何储存 SDS 裂解的磷酸化蛋白样本?
答:如果短期内使用 ( 少于 3 个月 ),SDS 样本细胞裂解液可以储存在 -20°C,如果长期储存,应保存于 -80°C。活化的蛋白样本的降解变化很大,其降解率取决于每种蛋白的性质和样本里究竟含有多少活化的蛋白。
3. 问:能用室温孵育抗体 1 小时代替 4°C过夜吗?
答:不建议。CST 公司活化状态的特异性抗体用于区分一或两个翻译后修饰的氨基酸残基。这些修饰包括磷酸化,乙酰化和酶切割。与识别总蛋白的抗体相比,大多数针对这些修饰位点的抗体具有较低的亲和性。因此,通过 4°C孵育过夜延长抗原和抗体的反应时间以获得最好的信噪比是非常关键的。